副溶血性弧菌細菌生化鑒定盒（SN標準）-環凱微生物官網

副溶血性弧菌細菌生化鑒定盒（SN標準）

英文名稱：

貨號：071771

規格：18種×5次/盒

用途：常規鑒定溶血性弧菌15項生化反應(參考“中華人民共和國進出口商品檢驗行業標準SN/T0173-201

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副溶血性弧菌細菌生化鑒定盒(18種×5次)(SN/T 0173-2010)

一)整套試劑及用品

鑒定生化反應的24種試劑(表1)、5瓶0.85%無菌生理鹽水、1瓶0.5 McFarland的濁度管、5支一次性吸管。

二)西林瓶的使用方法

開啟西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表麵，在無菌條件下，按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋，撕開鋁蓋，打開西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用後均高壓滅菌後方可棄去。

三)副溶血性弧菌生化鑒定盒的詳細使用方法

注意：如有特殊的接種方式、培養時間、溫度或培養方式，請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。

副溶血性弧菌為革蘭氏陰性無芽胞杆菌，易呈多形態，有棒狀、弧狀、卵圓狀、球狀、絲狀等，排列不規則，一般大小為0.3～0.7µm×1～2µm，單端一根鞭毛，有動力，運動活潑，兩端濃染，在固體培養條件下能生長周鞭毛。菌落常為隆起，圓形，稍渾濁不透明，表麵光滑，濕潤，不產生色素。

挑取平板分離的可疑菌落劃線接種3%NaCl胰蛋白腖大豆瓊脂平板35－37℃培養18－24h，革蘭氏染色鏡檢，並將新鮮菌苔置於已配備的無菌生理鹽水中，與0.5 McFarland的濁度管比濁，將菌懸液製備成0.5McFarland ( 約108cfu/mL )，用吸管吸取2滴（約0.06mL）菌懸液加入每種微量生化管內。將已接種的西林瓶再套上膠塞，一般采用全加塞（如圖2左兩瓶所示），特殊情況在下表注明采用半加塞（如圖2右兩瓶所示），直立於內托的凹槽內（如圖2），或放置於合適的瓶架中，於35－37℃培養箱中培養，結果觀察見表1。

注意：如有特殊的接種方式、培養時間、溫度或培養方式，請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。

表1

產品名稱	結果判定	結果觀察溫度、時間（小時）	使用說明
陽性	陰性
氧化酶試劑	藍紫色	不變色	30秒	滴加1滴試劑到一小塊潔淨濾紙上，以剛剛浸濕為宜；用玻棒或接種環（鉑或塑料）挑取適量新鮮菌苔塗在紙片上。
1%NaCl三糖鐵瓊脂	產氣有氣泡，產酸變黃色，產硫化氫變黑色，有動力擴散生長	無氣泡，不變色無擴散生長	35－37℃、24	用接種針挑取新鮮菌苔穿刺，穿刺完畢後在斜麵上劃“之”字形接種，豎立培育。西林瓶半加塞（如圖2右兩瓶所示）後豎立培育。
無鹽腖水、3％NaCl腖水、6％NaCl腖水、8％NaCl腖水、10％NaCl腖水	生長	不生長	35－37℃、24
3%NaCl蔗糖	黃色	紫色	35－37℃、8－24
1%NaCl賴氨酸脫羧酶 1%NaCl鳥氨酸脫羧酶	試驗管藍綠色，對照管變黃	試驗管與對照管均變黃	35－37℃、18－24	每株被檢菌應同時接種氨基酸對照管一支，並加滅菌液體石蠟3－4滴覆蓋培養基表麵。培養18－24小時，未見陽性結果，繼續培養4天，再做最終結果判定。
1%NaCl精氨酸雙水解酶	試驗管藍綠色，對照管變黃	試驗管與對照管均變黃色	35－37℃、24—48	同上，同時接種氨基酸對照管一支，並加滅菌液體石蠟3－4滴覆蓋培養基表麵。試驗管變藍綠色，對照管變黃為陽性，兩管均為黃色為陰性，作假單胞菌屬鑒定時不需覆蓋液體石蠟。
β－半乳糖苷（ONPG）	深黃色	淡黃色或無色	35－37℃、12－24
3%胰蛋白腖大豆瓊脂斜麵（42℃生長）	生長	不生長	42℃、24
OF( Hugh-leifson)			35－37℃、24—48	被檢菌同時接種兩支生化管，其中一支加滅菌液體石蠟5-8滴覆蓋表麵。兩支管均為黃色判斷為發酵型細菌；加石蠟管不變黃，而未加石蠟管變黃為氧化型細菌；兩支管均不變黃為產堿型細菌。
V-P 半固體	動力：擴散生長，VP：滴加VP試劑後變紅色	動力：無擴散生長， VP：滴加VP試劑後變紅色	35－37℃、24—48	用接種針挑取新鮮菌苔穿刺接種，豎立培育。培養後依次加入8滴VP試劑甲液及4滴乙液，混勻，再培養10－20分鍾觀察結果。
1%NaCl蛋白腖水	紅色	不變色	35－37℃、24—48	西林瓶西林瓶半加塞（如圖2右兩瓶所示）培養後加靛基質試劑2-3滴，立即觀察結果。

備注：本鑒定盒是按照環凱產品目錄中的品種成份從左到右的順序擺放。

四）副溶血性弧菌的生化特性見表2

表2 副溶血性弧菌的生化性狀

試驗項目	結果
革蘭氏染色鏡檢	陰性，無芽胞，呈棒狀、弧狀、卵圓狀
氧化酶	+
3%NaCl三糖鐵瓊脂	底層變黃不變黑，不產氣，斜麵不變色或紅色加深，穿刺接種處擴散生長
無鹽腖水	－微弱生長
3% NaCl腖水	+
6% NaCl腖水	+
8% NaCl腖水	+
10％NaCl腖水	－或微弱生長
3%NaCl蔗糖	+
靛基質	+
3%NaCl賴氨酸脫羧酶	+
3%NaCl賴氨酸脫羧酶	+
3%NaCl精氨酸雙水解酶	－
V-P	－
動力	+
β－半乳糖苷（ONPG）	－
42℃生長	+
OF ( Hugh-leifson)	不分解

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副溶血性弧菌細菌生化鑒定盒（SN標準）

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